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淋病奈瑟球菌四种检测法对比及应用

淋病在中国性传播疾病中的发病率位居第2,主要为淋病奈瑟球菌引起的泌尿生殖系统疾病,全球每年新增病例超过6 000万 。由淋病奈瑟球菌感染引起的附睾炎、盆腔炎等给患者心理和身体健康造成极大危害,有研究证实淋病可促进人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)的传播。本研究旨在比较4种常见的淋病奈瑟球菌检测方法,为临床应用提供参考。 1资料与方法 1.1标本来源 收集201 2年1月至2O12年9月本院泌尿科患者尿液和妇科患者的宫颈分泌物及尿液,采集的标本中,已知泌尿系统淋病奈瑟球菌感染35例,疑诊淋病奈瑟球菌感染35例。 1.2 主要试剂 淋病奈瑟球菌选择性培养基(T—M)购自天津市金章科技发展有限公司,氧化酶试剂、APINH生化鉴定试纸条为法国生物梅里埃公司产品,快速革兰染色液购自珠海贝索生物技术有限公司,淋病奈瑟球菌抗原检测试剂盒购自郑州安图绿科生物工程有限公司,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)试剂盒购自上海科华生物工程股份有限公司。 1.3检测方法 (1)培养法。用无菌棉签采集男性患者尿道内2~4 CII]处分泌物,女性患者宫颈口内侧0.5~1.0 cm处分泌物黏液,立即接种于淋病奈瑟球菌选择性培养基(T—M),置 35℃,5 CO 培养箱中培养48 h。圆形、凸起、湿润、半透明或灰白为淋病奈瑟球菌特征,氧化酶试验阳性和革兰染色阴性的双球菌判定为淋病奈瑟球菌阳性。(2)直接涂片法。取采集的分泌物立即涂片,待自然干燥后行革兰染色,在显微镜油镜下观察2o个视野。涂片染成红色或粉红色,形态为肾形对称或半圆形对称排列者,为淋病奈瑟球菌阳性;而单个或成团位于细胞内或细胞外者,为革兰阴性双球菌。(3)快速抗原检测法。严格按照淋病奈瑟球菌抗原检测试剂盒说明书操作。当加人快速检测液时,若产生的气泡绕试管壁成环形,则为淋病奈瑟球菌阳性。(4)PCR法。按说明书操作,通过凝胶电泳观察色带判定结果。 1.4统计学处理 采用SPSS13.0软件进行统计学分析,计数资料用Y 检验,以P0.05)。

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